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色谱柱的运用和维护12关键

作者:admin  来源:www.fjsunchem.com   更新时间:2016-12-19  阅读数:142

色谱柱的运用和维护
在平时别离剖析作业中,色谱柱的准确运用和维护十分重要,色谱柱运用是不是妥当,直接影响色谱柱的寿数,稍有不小心就会下降柱效、缩短运用寿数乃至损坏。在色谱操作过程中,需求留意下列疑问,以维护色谱柱。

1.柱子在装卸、替换时,动作要轻,接头拧重要适度。有必要避免较强的机械振动,避免柱床产生空地。
2.假如仪器用来做惯例剖析,样品种类有限,但剖析次数多,则无妨为每一类惯例剖析装备一根专用柱,这么有助于延伸柱子的寿数。
3.避免压力和温度的急剧改动及任何机械震动。温度的俄然改动或许使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情况;柱压的俄然增加或下降也会激动柱内填料,因此在调理流速时应当缓慢进行,在阀进样时阀的滚动不能过缓。
4.应逐步改动溶剂的组成,特别是反相色谱中,不该直接从有机溶剂改动为全部是水,反之亦然。
5.如运用柱温操控装置时,应留意在通人活动相后才干升温。

6.通常说来色谱柱不能反冲,只要生产者指明该柱能够反冲时,才能够反冲除掉留在柱头的杂质。否则反冲会敏捷下降柱效。
7.挑选运用适合的活动相,以避免固定相被损坏。有时能够在进样器前面衔接一个预柱,剖析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使活动相在进入剖析柱之前预先被硅胶“饱满”,避免剖析柱中的硅胶基质被溶解。
8.避免将基质杂乱的样品尤其是生物样品直接注人柱内,需求对样品进行预处理或许在进样器和色谱柱之间衔接一个维护柱。维护柱通常是填有类似固定相的短柱。维护柱能够并且应当常常替换。
9.常常用强溶剂冲刷色谱柱,铲除保留在柱内的杂质。在进行清洁时,对流路体系中活动相的置换应以相混溶的溶剂逐步过渡,每种活动相的体积应是柱体积的20倍摆布,即惯例剖析需求50-75mL。
10.保留色谱柱时应将柱内充溢乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,避免溶剂蒸发枯燥。肯定禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时刻。

11.色谱柱运用过程中,假如压力增加,一种也许是烧结滤片被阻塞,这时应替换滤片或将其取出进行清洁;另一种也许是大分子进人柱内,使柱头被污染;假如柱效下降或色谱峰变形,则也许柱头呈现塌陷,死体积增大。
12.在完结别离剖析作业之后,不该当即停机,需及时对色谱剖析体系进行冲刷,通常0.5h以上,以除掉色谱柱内的杂质。




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